HPLC整機幾項最關(guān)鍵的性能技術(shù)指標(biāo)的測試方法

　　1、靈敏度的測試方法

　　HPLC的靈敏度可定義為：一、定量的物質(zhì)，通過HPLC的檢測器時，儀器所給出的信號大小就叫做該HPLC的靈敏度，有時也稱為響應(yīng)值。對使用者來講，總是希望HPLC儀器有較高的靈敏度，因為靈敏度高，就意味著對等量的同一樣品進行檢測時，儀器有較大的輸出信號。但是，靈敏度的高低，并不能表示HPLC儀器的檢測能力。只有檢出限，才能表示儀器的最大檢測能力。

　　HPLC靈敏度的測試方法：主要根據(jù)信噪比的定義進行測試。一般取信號等于或大于噪聲2倍時的檢測量或濃度(信號強度)作為HPLC的信號大小。信號與噪聲二者相除即為儀器的信噪比(靈敏度，但是要求S/N≧2)。

　　2、檢測限測試方法

　　講HPLC的指標(biāo)、給出HPLC的譜圖，應(yīng)該實事求是的給出使用的靈敏度量程(一般使用最靈敏量程)，給出樣品濃度(一般是噪聲的3倍左右)，才能說明儀器的檢測限或靈敏度。

　　3、光學(xué)類檢測器噪聲的測試方法

　　HPLC的噪聲是一種與被測樣品無關(guān)的、隨機輸出的信號。國際上對噪聲的定義、測試方法各異。例如：美國材料協(xié)會制訂的測試標(biāo)準(zhǔn)(ASTM)，規(guī)定噪聲分為長噪聲、短噪聲、和超短噪聲三種。長噪聲是指每小時內(nèi)有6個至60個變化周期的噪聲，所以，測定時間至少應(yīng)該測試一小時;短噪聲是指每小時內(nèi)有1個至10個變化周期的噪聲，所以，測定時間至少應(yīng)該測試10分鐘至60分鐘內(nèi);超短噪聲是指每分鐘內(nèi)有10個以上的變化周期的噪聲，所以，測定時間應(yīng)該大于1分鐘。

　　從使用者的角度看，噪聲又分為靜態(tài)噪聲和動態(tài)噪聲。其測試方法如下：

　　1)靜態(tài)噪聲測試：冷態(tài)開機(關(guān)機2小時后開機)，預(yù)熱30分鐘，連續(xù)測試1小時。在這1小時里，任取10分鐘(包含最差的峰-峰值)，在這10分鐘里取峰對峰值(P-T0-P)的最大值，就是儀器的噪聲。但是，10分鐘里的峰對峰(P-T0-P)值，不同于10分鐘里的任一地方的峰-峰(P-P)值，即：“10分鐘里的峰對峰”值，不等于瞬時的峰-峰(P-P)值，測試數(shù)據(jù)前面應(yīng)加“±”符號。

　　注意：開機30分鐘后，儀器調(diào)整到最靈敏度檔(如：對量程為0.005-3.0AUFS的儀器，取0.005AUFS，即縱坐標(biāo)設(shè)置為0.005A);設(shè)置波長λ=250nm(有人設(shè)置500 nm，但最好測試250 nm);設(shè)置0 Abs(即時間掃描，吸光度從0點開始測試);光譜帶寬(SBW)=2nm(固定光譜帶寬的儀器不需選擇)。

　　在上述條件下，連續(xù)測試1小時(用儀器上的CRT指示輸出，或用數(shù)字電壓表監(jiān)測)。在1小時內(nèi)，任取10分鐘的峰對峰值(P-T0-P)，其最大者前面加“±”符號，即是儀器的噪聲。目前，國際上大多數(shù)科技工作者，基本上采用這種方法測試HPLC儀器的靜態(tài)噪聲。

　　有些科技工作者，認為在10分鐘的峰對峰值(P-T0-P)前如果要加“±”符號，就應(yīng)對峰-峰值的絕對值先除“2”。這種做法是不妥的，會低估儀器的噪聲。因為噪聲是隨機的，可能是“+”值也可以是“-”值。

　　上述儀器條件的設(shè)置，在有些儀器上是不需要的，因為由于計算機的發(fā)展和普遍應(yīng)用，很多儀器的坐標(biāo)設(shè)置，完全由儀器的計算機自動設(shè)置。